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VHH纳米抗体纯化应用案例
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应用描述
参数
简介
纳米抗体（Nanobody, Nbs）是由比利时科学家于1993年在自然杂志中首次报道，是骆驼科动物(骆驼，大羊驼，羊驼及其近亲物种)缺失轻链的天然重链抗体的可变区（VHH）组成的单域抗体，该抗体只包含一个重链可变区（VHH）和两个常规的CH2与CH3区，VHH晶体为2.5nm，长4nm，分子量只有15KD，内部存在二硫键，且表面有大量亲水残基，对热和PH值有较强的抵抗力，被称为“生物导弹”的治疗性抗体药物。
纳米抗体（Nanobody）与传统抗体相比较，在结构上存在较大差异，所以其特性也表现不一样。纳米抗体具有相对分子质量小、人源化简单、亲和力高、稳定性高、可微生物表达、免疫原性低、穿透力强、可溶性好等优势。使其在基础医学研究以及疾病诊断和治疗方面具有广阔的应用前景。
纯化工艺：
与传统的lgG相比，与骆驼发现的单链抗体（HCAb）缺少轻链和重链CH1,只含有CH2、CH3和可变区。HCAb抗原绑定部分由重链可变区构成，通过对其组装改造，该双特异性的纳米抗体的相对分子质量为22~30 k 之间 。
365体育APP官网采用两步离子纯化方法，阴离子流穿+阳离子结合模式，最终纯度达到95%以上，收率达到90%以上。
结果
经第一步NanoGel™-50Q流穿模式纯化后，从SDS-PAGE上分析，纯度提高至80%左右，26k左右的目的条带明显；第二步NanoGel™-50SP结合模式纯化后，上下杂带基本去除，纯度提高至95%以上。
注：获得完整版信息，请联系我们
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